Der Realtime PCR und Digital PCR Kurs richtet sich an erfahrene PCR Anwender und an Einsteiger. Wichtige PCR Grundlagen werden erörtert, bevor die Realtime PCR besprochen und Genexpressions-Untersuchungen pipettiert sowie ausgewertet werden. Die neue Digital PCR wird grundlegend erklärt.
Für den Kurs kann nach § 11 des Berliner Bildungsurlaubsgesetzes (BiUrlG) Bildungsurlaub geltend gemacht werden.
Der Kursinhalt setzt sich aus drei Teilen zusammen unter anderem mit folgendem Inhalt:
Theorie:
- Einführung in die PCR und Vertiefung der einzelnen Arbeitsabläufe für die Realtime PCR
- Übersicht von absoluten und relativen Quantifikationsstrategien
- Normalisierung von Daten
- Darstellung von wichtigen Termen
- Darstellung der ∆∆Ct-Methode und Demonstration einer Auswertung mit MS Excel
- Überblick von Sonden und Primerdesign-Werkzeugen sowie Einführung in Biodatenbanken um Zielgensequenzen zu finden
- Applikationen und Einflussfaktoren der Realtime PCR
- Einführung in die Digital PCR (dPCR)
- Darstellung der Unterschiede zwischen klassischer PCR, Realtime PCR und der dPCR
- Grundlagen der Detektionssysteme sowie Anwendungen in der dPCR
Labor:
- Durchführung von RT-PCR (Reverse Transkriptase-PCR) aus verschiedenen Geweben
- Darstellung der Unterschiede zwischen hexamere, oligo-dT Primer und spezifischen primern bei der RT-PCR
- Erläuterung der Unterschiede von Ein-Schritt und Zwei-Schritt RT-PCR Reaktionen
- Durchführung von RealTime PCR Pipettierungen mit unterschiedlichen Mastermixen für verschiedene Zielgene und Gewebe cDNAs
Auswertung:
- Excel als Werkzeug für Geräteunabhängige Auswertung von RealTime PCR Daten
- Organisation von produzierten Labor-Daten in Excel für eine anschließende Auswertung
- Berechnung von PCR-Effizienzen und Erläuterung von Grenzwerten
- Anwenden von Formeln, wie z. B. Summe, Mittelwert, Standardabweichung, Wurzelfunktion u.s.w.
- Gemeinsame Auswertung von produzierten Labor-Daten mit der ∆∆Ct-Methode Schritt für Schritt
Dauer:
Der Kurs dauert 2 Tage und bietet neben theoretischem Wissen auch praktisches Arbeiten im S1 Labor sowie eine Expressionsauswertung an einem Einzelarbeitsplatz.
Gruppenstärke:
Maximal 10 Teilnehmer. Der Kurs wird erst ab Erreichen der Mindestteilnehmerzahl durchgeführt.
Zielgruppe:
Die Zielgruppe umfasst Angestellte im technischen und wissenschaftlichen Bereich sowie Laboranten/innen mit abgeschlossener Berufsausbildung und Mitarbeiter/innen aus biologisch-biowissenschaftlichen und medizinischen Einrichtungen mit Labor-Erfahrung.
Voraussetzungen:
Der Realtime PCR und dPCR Kurs richtet sich an erfahrene PCR Anwender und an Einsteiger.
Kursgebühr:
708,05 Euro je Teilnehmer inkl. MwSt.
Selbstzahler erhalten einen Rabatt von 10 % auf die Kursgebühr.